眼内液检测:顾名思义,就是通过检测眼内液体(房水,玻璃体液,视网膜下液等)的成分来诊断或判断眼科疾病的严重程度;因为眼球结构的特殊性,眼内局部微环境以及血眼屏障的存在,血液检测往往不能反映眼内的真实情况,因此眼内液在某些眼科疾病的确诊中非常重要。
眼内液的临床应用主要分为3种模式:一种是印证式,一种是除外式,一种是随诊式。印证式指临床医生根据临床表现可以得出大致的判断,进行针对性强的眼内液检测项目,以证实自己的临床判断;除外式指的是由于临床病变处于早期,或临床表现不典型,或者临床表现中出现矛盾的情况,以至于临床医师不能得出一个概率比较高的临床判断,因此采用一些代表性强,相对出现概率高的检测项目来帮助临床医师缩小拟诊范围或寻找病因;随诊式就是已经明确了病因,通过检测个别眼内液项目来判断治疗效果,药物是否耐药,指导治疗时长等。
眼内液检测主要分为以下几种:
1.细胞因子
用于各类眼内炎症、血管性疾病、纤维增生性疾病、黄斑水肿检测及科学研究
2.细胞亚群分析
临床考虑眼内炎症、淋巴瘤等疾病时,可进行细胞亚群分析,辅助诊断
3.HLA分型
临床疑似白塞氏、小柳原田等和HLA等位基因相关性较大的疾病时进行检测
4.基因筛查
临床考虑基因遗传导致的眼内疾病时进行检测
5.细菌类检测
临床考虑细菌感染导致的眼内炎或葡萄膜炎时检测
6.基因芯片
临床判断为感染性眼内炎症,但微生物未明,检测在眼科常见的20种致炎微生物,为进一步抗炎药物选择寻找依据
7.寄生虫
临床考虑弓形虫、弓蛔虫感染时进行检测,辅助诊断
8.抗体检测
临床考虑眼内病毒感染(陈旧)或真菌感染时检测,辅助诊断
9.微生物成分
临床考虑为病毒、细菌、真菌感染时,进行微生物成分检测,辅助判断病毒、细菌或真菌感染
为什么要采集眼内液进行检测呢,眼内液检测的意义和价值在哪里?
原位取材收集局部组织或组织液进行检验或病理检查,可以得到准确的局部病变信息,在病变的情况下,血眼屏障遭到破坏,检测血液指标无法反映眼内情况,因为眼内组织稀释入血后浓度微乎其微,并且眼球的封闭结构,眼内病原微生物也不易穿出眼球入血。所以进行眼内液检测的必要性在于:血眼屏障的存在导致眼内是独立的微环境,无论生理还是病理情况下,检测血液指标均不能反映眼内真实情况;采集眼内液的意义在于:获取眼内局部的病原,免疫以及细胞病理,分子层面等的原位信息,以辅助临床进行诊断。
眼内液检测主要适用以下情况:
1.感染性和不明原因的葡萄膜炎
2.视网膜/脉络膜血管性疾病(该类疾病具有不同的细胞因子表达谱,利用生物标志物,可以辅助诊断,并对疾病进行分型分期;同时该类疾病需要眼内注射抗VEGF药物等进行治疗,注药前收集房水进行细胞因子检测,有助于精准判断眼内的新生血管化和免疫状态,指导临床用药)
3.临床表现不典型,对传统方法治疗无反应的进行性视网膜,脉络膜及其色素上皮病变
4.辅助精准治疗(比如通过考察眼内液细胞因子滴度在治疗后的变化,可以在短时间内评价是否耐药,以及临床判断是否正确,制定用药方案和治疗时机)
5.其他可能适用的疾病
眼内液常见的检测手段:
1.DNA检测
PCR,多重固相条带PCR,多重PCR,环介导恒温扩增LAMP,NGS
2.细胞因子/抗体检测
Western blot,ELSIA,液相芯片,电化学发光,流式细胞术
眼内液检测结果的计算和处理(以抗体检测为例):
²Goldmann/Witmer系数(GW系数)
正常情况下,眼内液中的蛋白成分与血浆中的蛋白成分不同,处于免疫赦免的需要,免疫球蛋白的含量很低。如果血眼屏障破坏,则血清中的蛋白成分(包括抗体类免疫球蛋白)会渗透到眼内,如果此时检测眼内液的抗体成分阳性,会导致临床误诊。因此GW系数主要是辅助判断眼内该特异性抗体是眼内原位产生还是因为渗漏导致的假阳性。
GW系数=(眼内某种IgG浓度/眼内总IgG浓度)/(血清某种IgG浓度/血清总IgG浓度)
GW系数在0.5~2表示没有眼内原位抗体产生;2~4之间提示有眼内原位抗体产生;≥4可以确定有眼内原位抗体产生。
²Witmer Desmonts系数
WD系数=(眼内某种特定IgG浓度/眼内总白蛋白浓度)/(血清某种特定IgG浓度/血清总白蛋白浓度)
WD系数主要用于近期可疑的病毒感染,或是存在发热等全身感染迹象的情况,该情况下血清IgG浓度会显著升高,但是白蛋白总量相对恒定。
2022-05-05
2022-04-14
2022-04-12
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